Page 35 - No8
P. 35
MODELL-MEMBRÁNOK
valamint egy üres mintatartót együtt,
meghatározott fűtési program szerint mele-
gítünk, a környezettől termikusan elszigetelt
térben. Ha a mintában olyan fázisátalakulás
következik be, amit hőeffektus kísér, a két
cella között hőáram indul. A hőmérséklet
függvényében ábrázolt hőfluxus különb-
ségből (DSC-görbe) meghatározható az álla-
potváltozásokat kísérő fázisátmeneti hő kez-
deti hőmérséklete (T kezd ), végső hőmérsékle-
te (T ), a folyamat fajlagos átalakulási hője
vég
(∆H/mol lipid), illetve a görbe minimum
helye, ami egyben a fázisátmenet hőmérsék-
2. ábra. DPPC és sematikus ábrázolása, a kettősrétegbe rendeződés és bezáródás letének közelítő értéke (T ).
m
A 4. ábra az alkalmazott vizsgálati
A modell-rendszerek vizsgálatát is puffe- NaCl hozzáadása mellett is alkalmaztuk, módszerek jellegzetes mérési görbéit
rekben végzik. A puffermolekula egy újabb amivel a só-koncentrációnak a vezikulák mutatja be a DPPC/víz alap-rendszerre
komponens a lipid/víz alap-rendszerben, szerkezetére kifejtett hatását is vizsgáltuk. vonatkozóan. Az ábra legfelső sorában a
ennek ellenére a pufferek közvetlen hatá- A DPPC alkotta vezikulák szerkezete DSC görbe látható, amelynek két lefelé
sáról kevés információ található az iroda- hőmérsékletfüggést mutat. Kalorimetriás mutató csúcsa két fázisátmenetet mutat. A
lomban. A következőkben a Tris-puffer módszerrel (Differenciális pásztázó kalori- két fázisátmenet három fázist, a gél, a hullá-
(2-amino-2-hidroximetil-1,3-propándiol, 3. metria; Differential scanning calorimetry – mos gél és folyadékkristályos fázisokat
ábra) vezikulákra kifejtett hatásának kisérle- DSC) a különböző mezomorf állapotok (fázi- kapcsolja össze (a fázisokat jellemző rétegek
ti módszerekkel történő jellemzését sok) közötti átmeneti hőmérsékletek és így sematikus képei is fel vannak tüntetve).
mutatjuk be. az egyes állapotokra jellemző hőmérséklet- 35°C-nál az ún. előátmenet detektálható. A
Az alkalmazott Tris-puffer széles körben tartományok vizsgálhatók. A módszer lénye- fázisátmenet során a rendszer gél fázisból
elterjedt a biokémiai és molekuláris biológi- ge, hogy egy kis méretű mintát tartalmazó, hullámos gél fázisba kerül. A hullámos fázis
ai vizsgálatoknál. A Tris vízben történő felol-
dása után lúgos kémhatású, az oldat pH-ja
ecetsav adagolásával állítható be.
Disszociációs állandója pK = 8,06. Ez ideá-
a
lis az élőlények fiziológiás pH értékének
beállításához. Ezt a széles körben alkalma-
zott puffert különböző koncentrációkban, és
4. ábra. Vizsgálati módszerek jellegzetességei az alap-rendszer tulajdonságain
3. ábra. A Tris molekula keresztül
KÉMIAI PANORÁMA 8. SZÁM, 2012. ÉVFOLYAM 1. SZÁM 35